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研究太子参对急性心肌梗死心力衰竭大鼠心肌重构的作用

时间:2018-01-20 药学毕业论文 我要投稿
摘要:目的: 研究太子参对左冠状动脉前降支结扎所致急性心肌梗死慢性心衰大鼠心肌重构的作用,并探讨其可能的机制。方法: 设假手术组、模型组、太子参高剂量组和低剂量组,后3组结扎大鼠冠状动脉导致急性心肌梗死(AMI)复制慢性心衰大鼠动物模型,造模后1周,太子参组开始给药5周;以死亡率、心肌重构指数分析心肌重构的程度,酶联免疫吸附试验(ELISA)分析血清中IL-6和TNF-α的水平。结果: 冠脉结扎6周后,模型组大鼠死亡率高达43.8%,心肺指数、心肌重构指数及血清中IL-6和TNF-α的水平显著增加,与假手术组比较,差异显著;而太子参组上述指标具有显著改善作用。结论: 太子参对急性心肌梗死诱发的慢性心衰具有一定的;ぷ饔,其作用可能与太子参影响细胞因子有关。

关键词:孩儿参; 心力衰竭; 心肌梗死; 心肌重构; 白细胞介素6; 肿瘤坏死因子; 大鼠


  急性心肌梗死(AMI)后诱发的慢性心衰是心血管系统疾患的主要死亡原因[1]。因此,防治心肌梗死后诱发心衰的心肌重构过程成为目前研究的焦点。随着人们对化学药品毒副作用的不断认识,天然药物由于毒副作用小,越来越受到人们的青睐。太子参是石竹科植物孩儿参Pseudostellaria heterophylla(Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.的干燥块根,具有益气健脾、生津润肺之功效。临床主要用于脾虚体倦,食欲不振,病后虚弱,气阴不足,自汗口渴,肺燥干咳等[2]。研究提示太子参含有环肽类、三皂苷类、多糖类等,具有抗疲劳、抗缺氧、抗应激、抗炎、抗衰老、增强免疫力、延长寿命以及镇咳及抗菌抗病毒等药理作用[3]。根据太子参的现代药理作用与本室前期研究结果,2006年-2007年,研究了太子参对急性心肌梗死诱发心力衰竭心肌重构的作用及与炎症细胞因子的关系,为太子参资源的合理开发和有效利用提供实验基础。
  1 材料与方法
  1.1 材料
  药材太子参Radix Pseudostellariae采自贵州省雷山县方祥乡贵州信邦太子参基地(获得GAP资质认证),经贵阳医学院生药学与药用植物学教研室龙庆德老师鉴定为石竹科植物孩儿参Pseudostellariaheterophylla(Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.的干燥块根。将太子参500 g置于烧瓶中,加常水煎药至约500 ml,过滤后,药渣再加适量水,煎至约250 ml,与第一次药液合并,旋转蒸发仪50 ℃减压浓缩至250 ml,含生药2 g/ml,备用。
  1.2 试剂及仪器
  IL-6、TNF-α ELISA分析试剂盒是武汉博士德生物工程有限公司产品,ELX800酶标仪由美国GE公司生产,Eppendorf5417R冷冻离心机由德国Eppendorf AG生产。BS223S电子天平由德国sartorius生产,HX-300动物呼吸机是成都泰盟科技有限公司生产。
  1.3 慢性心衰大鼠模型的制备[4]
  体重250~280 g 雄性SD大鼠,10%水合氯醛腹腔注射(3 ml/g),大鼠四肢固定在手术台上,人工呼吸机呼吸频率55次/min,潮气量18~25 ml。胸部去毛、消毒,沿左锁骨中线纵向切开皮肤约2 cm,打开胸腔,剪开心包,轻压右侧胸廓,挤出心脏。用医用缝合线在动脉圆锥与左心耳之间冠状静脉处结扎左冠状动脉前降支,把心脏迅速放回胸腔。排尽气体,缝闭胸腔,恢复大鼠自主呼吸,停止人工呼吸。假手术组大鼠冠脉穿线但不做结扎手术。
  1.4 分组及给药
  实验分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、太子参(RP)高剂量组(20 g/kg)、太子参低剂量组(10 g/kg);实验结束时,保证各组至少有8只动物存活。太子参组造模后1周开始给药,连续给药5周。
  1.5 观测指标
  记录各组大鼠结扎冠脉1周至给药结束的死亡数,计算死亡率。心室及肺重量、重量指数测定[5]:股静脉注人10%KCl 1~2 ml,使心脏停搏于舒张期,开胸取出心脏,用PBS洗去血液,滤纸吸去水分后用电子天平(精确到1 mg)分别称取左心室(含室间隔)与肺的重量及与体重比,得到左室、肺指数。心室重构指标测定[6]:用游标卡尺测量左室前壁(心梗区)厚度、左室后壁(非梗死区)厚度、室间隔厚度、左室长径、左室内径、球形指数(L/R)、左心室前壁厚度和左室内径比值(LVAW/R)均采用双盲法测定,同一标本测量3次,取均值。IL-6与TNF-α检测[7]:大鼠颈总动脉放血,室温放置自凝后,1 500r/min离心,取上层血清放入-70 ℃超低温冰箱待测。收集标本后,用ELISA测定。
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